デジタルPCRは新しい絶対定量PCRであり、主にPCR反応物を有限希釈し、その後異なる反応室でPCR増幅を行い、最後にポアソン分布原理と陽性微小滴の個数と割合に基づいて標的分子の初期コピー数または濃度を得る技術である。
MicroDrop™デジタルPCRは科学研究、医療、出入国検査検疫などの分野に広く応用できる。
技術的特徴:
l絶対定量、Ct値に依存せず、標準曲線を必要としない
l超高感度、希少配列及び希少突然変異の検出に適用する
l正確な定量結果と優れた再現性
l複雑なサンプル検査を適用し、PCR抑制物の影響を受けにくい
主なメリット:
l高感度——デジタルPCRの感度は同体積反応系の分割部数に比例する。
l分解能――0.1倍まで低い遺伝子発現差異
絶対定量:各微小滴に含まれる平均コピー数及びポアソン分布に基づいて計算し、検査サンプルの絶対コピー数を導出する。同時に標準カーブに依存する必要はありません。
MicroDrop™マイクロ滴下式デジタルPCRシステムはMicroDrop-100 Aサンプル調製器、遺伝子増幅器、MicroDrop-100 Bフロー式微小滴検出器、およびQuantDrop解析ソフトウェアの4つの部分から構成されている。
検出原理:
MicroDrop™液滴式デジタルPCRシステムのワークフロー:
MicroDrop-100システム製品の特徴:
一、適応性が広く、柔軟性が高い
1、理論的にqPCR(蛍光定量PCR)をカバーできる
2、サンプル多様性、サンプルフラックスは96サンプルに達し、柔軟な設定をサポートする
3、オープンプラットフォーム、ユーザー自身が試薬、製品を開発することをサポートする。
二、感度が高く、正確性が高い
1、絶対定量——標準曲線に頼る必要がない
2、マイクロドロップ技術を用いて100000個までのマイクロドロップ
3、線形範囲は6桁に達し、感度は1万分の1に達する
三、分析可能な複雑な混合物
1、精度は増幅効率に完全に依存しない
2、二チャンネル蛍光検査、EvaGreen染料及びプローブ法を支持する
3、多重デジタルPCRをサポートする
四、操作が簡単で、使いやすい
1、全閉鎖汚染防止設計、ワンタッチ式自動化操作。
2、全中国語分析ソフトウェアを選択可能
機器の特徴:
MicroDrop-100 Aサンプル製造装置
1、1枚のチップは1回に8個のサンプルを処理することができる、
2、20マイクロリットル系は100000マイクロ滴を生成する、
3、単回微小滴生成には2分しかかからない、
4、ワンタッチ自動化操作。
けいきパラメータ | |
しりょうたいせき |
20μl |
ようりょう |
1~8サンプル |
液滴の総数 |
100,000 |
はんのうじかん |
2分/チップ |
計器寸法(幅x深さx高さ) |
300*400*145mm |
MD Detectorマイクロドロップ検出器
1、全閉鎖システム、自動プロセス操作、
2、FAM、VICデュアルチャネル蛍光検査;
3、検出感度は1万分の1に達した、
4、フラックスは96個のサンプルに達した。
けいきパラメータ | |
せんけいはんい |
6個数レベル |
フラックス |
1~96個のサンプル |
検出チャネル |
FAM 、HEX (VIC) |
計器寸法(幅x深さx高さ) |
700*500*325mm |
MicroDrop-100:QuantDropデータ解析ソフトウェア
デジタルPCRの応用
検査検疫 食の安全
•遺伝子組み換え食品検査(国基準)
•病原菌同定
•動物由来性検査分析
科学研究
•遺伝子発現差異モニタリング
•CRISPR-Cas 9遺伝子編集結果の検証
•メチル化含量の同定
•単細胞研究:配列決定、PCR
臨床
•腫瘍液体生検:早期スクリーニング、投与、モニタリング、再発
•非侵襲的生産前スクリーニング:低コスト、迅速
•感染性疾患:HBV、HIV定量